Creación de una serie de dilución química

En química, una dilución es el proceso de reducir la concentración de una sustancia en una solución. Una dilución en serie o una serie de diluciones es la dilución repetida de una solución para amplificar rápidamente el factor de dilución. Esto se hace a menudo durante experimentos que requieren soluciones muy diluidas con gran precisión, como aquellos con curvas de concentración en una escala logarítmica o aquellos experimentos para determinar la densidad de recuento bacteriano. Las diluciones en serie se utilizan ampliamente en las ciencias experimentales, como la bioquímica, la microbiología, la farmacología y la física.

Pasos

Método 1 de 2: Realice una dilución estándar

Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 1
1. Determinar cuál es el diluyente correcto. El líquido que utilizará para diluir una sustancia es muy importante. Muchas soluciones se diluyen en agua destilada, pero no siempre es así. Si va a diluir bacterias u otras células, probablemente las diluya en medios de cultivo. El líquido que elija se utilizará para cada dilución en serie.
  • Si no está seguro de qué diluyente usar, solicite ayuda o búsquelo en línea para ver si otras personas han hecho una dilución similar.
Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 2
2. Preparar varios tubos de ensayo con 9 ml de diluyente. Estos tubos sirven como valores iniciales de su dilución. Agregará la muestra sin diluir al primer tubo y luego la diluirá en serie en los siguientes tubos.
  • Es útil etiquetar todos los tubos antes de comenzar para no confundirse una vez que comience a trabajar con las diluciones.
  • Cada tubo de ensayo contiene una dilución de 10 veces en comparación con el líquido sin diluir. La primera probeta se convierte en una dilución de 1:10, la segunda de 1:100, la tercera de 1:1000, etc. Predeterminar el número de diluciones que necesita para no desperdiciar tubos de ensayo o diluyente.
  • Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 3
    3. Prepare un tubo de ensayo con al menos 2 ml de la solución sin diluir. La cantidad mínima requerida para esta dilución en serie es 1 ml de la solución sin diluir. Si solo tiene 1 ml, no obtendrá ningún resto de solución sin diluir. Etiqueta este tubo como OO para una solución ordenada.
  • Mezcle bien la solución antes de diluir.
  • Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 4
    4. Realizar la primera dilución. Tome 1 ml de la solución sin diluir en un tubo de ensayo OO con una pipeta y transferir al tubo de ensayo etiquetado 1:10 con 9 ml del diluyente y mezclar. Ahora hay 1 ml de la solución sin diluir en 9 ml del diluyente. Por lo tanto, la solución se diluye por un factor de 10.
    Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 5
    5. Realizar la segunda dilución. Para la segunda dilución en serie, tome 1 ml de la solución del tubo de ensayo 1:10 y haz esto con la dilución de 9 ml en el tubo de ensayo 1:100. mezclar tubo de ensayo 1:10 a fondo antes de agregar al siguiente tubo de ensayo. Una vez más la probeta 1:100 después de la dilución. La solución del tubo de ensayo 1:10 ahora se diluye 10 veces en el tubo de ensayo 1:100.
    Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 6
    6. Extienda este procedimiento para diluciones en serie con más series. Este proceso puede repetirse tantas veces como sea necesario para obtener la solución deseada. En un experimento con curvas de concentración, puede hacer una dilución en serie de una serie de soluciones con diluciones de 1, 1:10, 1:100, 1:1000.

    Método 2 de 2: calcular el factor de dilución final y la concentración

    Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 7
    1. Calcular la relación de la dilución final en una dilución en serie. La relación de dilución total se puede determinar multiplicando el factor de dilución de cada paso previo al último paso. Esto se puede ilustrar matemáticamente con la ecuación Dt=D1 xD2 xD3 x... xDnorte por lo cual Dt el factor de dilución total es y Dnorte la relación de dilución.
    • Por ejemplo, supongamos que aplica una dilución de 1:10 a un líquido 4x. Aplica tu factor de dilución a la ecuación: Dt=10x10x10x10=10.000
    • El factor de dilución final en el cuarto tubo de ensayo de su dilución en serie es 1:10.000. La concentración de la sustancia es ahora 10.000 veces menos que la solución original sin diluir.
    Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 8
    2. Determinar la concentración de la solución después de la dilución. Para determinar la concentración final de la solución después de la dilución en serie, debe conocer la concentración inicial. la ecuacion es Cvalor terminal=Cvalor inicial/D por lo cual Cvalor terminal es la concentración final de la solución diluida, Cvalor inicial la concentración inicial de la solución original y D la relación de dilución determinada previamente.
  • Por ejemplo: Si comenzó con una solución de células con una concentración de 1.000.000 células por ml y una relación de dilución de 1.000, entonces cuál es la concentración final de la muestra diluida?
  • Usando la ecuación:
  • Cvalor terminal= Cvalor inicial/D
  • Cvalor terminal=1.000.000/1.000
  • Cvalor terminal=1.000 células por ml.
  • Imagen titulada Do Serial Dilutions Step 9
    3. Comprobar si todas las unidades coinciden. Al realizar un cálculo, debe asegurarse de que las unidades del resultado final sean siempre correctas. Si comenzó con `células por ml`, asegúrese de terminar también con `células por ml`. Si su concentración inicial está en "partes por millón (ppm)", entonces su concentración final también debe ser "ppm".

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